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心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析

2025-07-26 關(guān)鍵詞:心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析項目報價,心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析測試周期,心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析測試案例 相關(guān):
心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析

心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析摘要:心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵(Na+/K+-ATPase)活性分析技術(shù)專注于量化心肌細(xì)胞膜泵功能,核心檢測對象為酶活性動力學(xué)參數(shù)及離子轉(zhuǎn)運效率。關(guān)鍵項目包括基礎(chǔ)泵活性測定(基于ATP水解速率)、抑制劑敏感性測試(如烏本苷濃度響應(yīng))和能量依賴性評估(涉及膜電位變化)。通過放射化學(xué)法或比色法實現(xiàn)高精度測量,確保參數(shù)如Vmax值和Km常數(shù)在生理及病理模型中的可靠性評估。

參考周期:常規(guī)試驗7-15工作日,加急試驗5個工作日。

注意:因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人除外)。

檢測項目

酶活性參數(shù):

  • 基礎(chǔ)ATP酶活性:[活性單位μmolPi/mgprotein/h,參照ISO21473]
  • 最大水解速率:[Vmax值,單位nM/min]
  • 米氏常數(shù):[Km值,單位mM]
離子轉(zhuǎn)運指標(biāo):
  • 鈉離子流出速率:[μmol/min/mgprotein]
  • 鉀離子攝取效率:[比率%,參照GB/T30475]
  • 膜電位變化:[ΔΨmmV]
抑制劑響應(yīng)檢測:
  • 烏本苷抑制率:[IC50值nM]
  • 地高辛敏感性:[抑制百分比%]
  • 特異性阻斷測試:[EC50nM]
細(xì)胞活力關(guān)聯(lián):
  • ATP含量:[nmol/mgprotein]
  • 乳酸脫氫酶釋放:[活性U/L]
  • 細(xì)胞存活率:[比率%]
膜完整性評估:
  • 膜流動性:[各向異性值]
  • 脂質(zhì)過氧化:[MDA含量nmol/mg]
  • 蛋白氧化損傷:[羰基含量nmol/mg]
應(yīng)激響應(yīng)分析:
  • 缺氧誘導(dǎo)變化:[活性變化%]
  • 再灌注損傷響應(yīng):[恢復(fù)率%]
  • 氧化應(yīng)激耐受:[ROS水平RLU]
代謝狀態(tài)檢測:
  • 葡萄糖消耗速率:[μmol/min/mg]
  • 乳酸生成量:[mM]
  • 耗氧率:[nmolO2/min/mg]
基因表達(dá)關(guān)聯(lián):
  • ATP1A1基因表達(dá):[相對表達(dá)量]
  • 亞基異構(gòu)體分析:[比例%]
  • 轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子:[活性指數(shù)]
藥理學(xué)影響:
  • 藥物干預(yù)響應(yīng):[EC50nM]
  • 毒性閾值:[LD50μM]
  • 協(xié)同效應(yīng)指數(shù):[CI值]
結(jié)構(gòu)性參數(shù):
  • 泵密度:[分子數(shù)/μm2]
  • 亞基構(gòu)象變化:[熒光強(qiáng)度AU]
  • 膜蛋白聚類:[聚類系數(shù)]

檢測范圍

1.離體灌流心肌組織:來自大鼠或兔心臟模型,重點檢測泵活性基礎(chǔ)值及灌流壓力響應(yīng)

2.原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞:人源或動物源細(xì)胞,側(cè)重單細(xì)胞水平離子轉(zhuǎn)運效率和抑制劑篩選

3.心肌切片樣本:冷凍或固定切片,聚焦膜完整性評估和局部活性分布

4.缺血性心肌模型:冠狀動脈結(jié)扎樣本,重點分析缺氧環(huán)境下泵功能障礙

5.再灌注損傷樣本:恢復(fù)期心肌組織,檢測氧化應(yīng)激對活性恢復(fù)的影響

6.基因編輯細(xì)胞系:CRISPR修飾心肌細(xì)胞,側(cè)重ATP1A基因突變響應(yīng)

7.藥物處理心肌樣本:抗心律失常藥暴露細(xì)胞,重點評估藥效學(xué)參數(shù)變化

8.老化心肌組織:老年動物模型切片,聚焦泵活性衰減與膜流動性關(guān)聯(lián)

9.心律失常相關(guān)樣本:病變心臟灌流模型,檢測電生理異常下的離子失衡

10.代謝綜合征心?。?/strong>高糖或高脂誘導(dǎo)樣本,側(cè)重能量代謝與泵活性耦合分析

檢測方法

國際標(biāo)準(zhǔn):

  • ISO21473:2018酶活性測定通用方法(采用比色法)
  • ISO10993-5:2009體外細(xì)胞毒性測試(細(xì)胞存活率評估)
  • ASTME2520-15膜電位測量規(guī)范(微電極技術(shù))
  • OECDTG471基因表達(dá)分析指南(qPCR參數(shù))
  • IUPAC離子選擇性電極標(biāo)準(zhǔn)(鈉鉀離子濃度測定)
國家標(biāo)準(zhǔn):
  • GB/T30475-2020生物酶活性檢測方法(ATP水解速率)
  • GB/T16886.5-2017醫(yī)療器械生物學(xué)評價(細(xì)胞毒性)
  • GB/T5009.124-2016食品中酶活性測定(比色法擴(kuò)展)
  • GB/T3723-1999離子濃度電化學(xué)測量(緩沖液差異)
  • GB/T19495.2-2004基因檢測技術(shù)規(guī)范(表達(dá)量校準(zhǔn))
方法差異說明:ISO標(biāo)準(zhǔn)側(cè)重通用酶動力學(xué)采樣頻率(每5分鐘),GB標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)緩沖液組成(如Tris-HCl濃度差異);ASTM膜電位法采用高頻采集,而GB方法優(yōu)化了溫度穩(wěn)定性。

檢測設(shè)備

1.分光光度計:ThermoScientificMultiskanGO(波長范圍340-750nm,精度±0.005AU)

2.熒光顯微鏡:OlympusIX83(激發(fā)波長488nm,分辨率0.2μm)

3.高速離心機(jī):Eppendorf5424R(最大轉(zhuǎn)速15000rpm,溫度控制±0.5°C)

4.微電極系統(tǒng):WarnerInstrumentsFD223(阻抗≥10MΩ,采樣率1kHz)

5.實時熒光定量PCR儀:Bio-RadCFX96(檢測限0.1拷貝,動態(tài)范圍10^6)

6.細(xì)胞培養(yǎng)箱:ThermoForma311(溫度37°C±0.1°C,CO2控制5%)

7.液閃計數(shù)器:PerkinElmerTri-Carb4910TR(計數(shù)效率≥95%,背景≤50cpm)

8.電生理記錄裝置:MolecularDevicesAxon700B(膜片鉗帶寬10kHz,噪聲<0.5pA)

9.質(zhì)譜儀:WatersXevoTQ-S(分辨率30000,質(zhì)量精度±0.001Da)

10.共聚焦顯微鏡:LeicaTCSSP8(Z軸分辨率0.35μm,掃描速度12fps)

11.恒溫振蕩器:GrantInstrumentsPSU-10i(振幅25mm,轉(zhuǎn)速50-300rpm)

12.pH計:MettlerToledoSevenExcellence(精度±0.001pH,溫度補(bǔ)償范圍0-100°C)

13.滲透壓計:AdvancedInstruments3320(測量范圍0-2000mOsm/kg,精度±1mOsm)

14.流式細(xì)胞儀:BDFACSAriaIII(檢測通道18個,流速12μL/min)

15.圖像分析系統(tǒng):Image-ProPlus10.0(像素分辨率0.1μm,分析速度30fps)

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡稱:中析研究所】

報告:可出具第三方檢測報告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測周期:7~15工作日,可加急。

資質(zhì):旗下實驗室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報告。

標(biāo)準(zhǔn)測試:嚴(yán)格按國標(biāo)/行標(biāo)/企標(biāo)/國際標(biāo)準(zhǔn)檢測。

非標(biāo)測試:支持定制化試驗方案。

售后:報告終身可查,工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)

中析心臟灌流心肌細(xì)胞鈉鉀泵活性分析 - 由于篇幅有限,僅展示部分項目,如需咨詢詳細(xì)檢測項目,請咨詢在線工程師